【摘 要】
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目的 研究5种二苯酮类紫外防晒剂对嗜热四膜虫外排泵的影响及分子作用机制.方法 将处于对数生长期的嗜热四膜虫分别暴露于不同浓度的二苯酮-1(BP-1)、二苯酮-2(BP-2)、二苯酮-6(BP-6)、二苯酮-8(BP-8)、4-羟基-二苯酮(4-OH-BP)和维拉帕米(VER,P-糖蛋白专属抑制剂),使紫外防晒剂的终浓度分别为0(对照)1.0、5.0、10.0、20.0、40.0、60.0和80.0μmol/L,VER的终浓度为10.0μmol/L.随后加入荧光指示剂罗丹明123(Rh123,终浓度为2.5
【机 构】
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宁夏大学地理科学与规划学院,宁夏银川750021;宁夏大学生态环境学院
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目的 研究5种二苯酮类紫外防晒剂对嗜热四膜虫外排泵的影响及分子作用机制.方法 将处于对数生长期的嗜热四膜虫分别暴露于不同浓度的二苯酮-1(BP-1)、二苯酮-2(BP-2)、二苯酮-6(BP-6)、二苯酮-8(BP-8)、4-羟基-二苯酮(4-OH-BP)和维拉帕米(VER,P-糖蛋白专属抑制剂),使紫外防晒剂的终浓度分别为0(对照)1.0、5.0、10.0、20.0、40.0、60.0和80.0μmol/L,VER的终浓度为10.0μmol/L.随后加入荧光指示剂罗丹明123(Rh123,终浓度为2.5μmol/L).30℃黑暗培养1 h后,测定细胞内蓄积Rh123的荧光值.以鼠P-gp(3G5U A)为模板,通过同源建模建立嗜热四膜虫P-gp三维结构,利用AutoDock 4.2软件对二苯酮类紫外防晒剂与嗜热四膜虫P-gp的相互作用进行计算模拟.结果 二苯酮类紫外防晒剂对嗜热四膜虫外排泵活性产生浓度依赖性抑制,BP-1、BP-2、BP-6和BP-8的半数抑制浓度(IC50)值依次为36.0、56.8、22.1和68.7μmol/L.相对抑制能力强弱顺序为BP-6>BP-1>二苯酮-3(BP-3)>BP-2>BP-8>4-OH-BP.二苯酮类紫外防晒剂通过疏水作用、氢键、静电作用等与嗜热四膜虫P-gp活性位点结合,亲和性大小顺序为BP-6>BP-1>BP3>BP-2>BP-8>4-OH-BP,与外排泵活性抑制结果一致.结论 二苯酮类紫外防晒剂对嗜热四膜虫外排泵活性具有抑制作用,分子对接可用于预测这类新兴污染物对水生生物的影响.
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