【摘 要】
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目的:在食管鳞癌细胞Eca109中建立自噬模型.方法:按照常规细胞培养方法,将Pmcheny-GFP-LC3质粒转染进入Eca109细胞,mcheny为红色荧光蛋白,GFP为绿色荧光蛋白,可示踪自噬体形成.
【机 构】
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新疆医科大学基础医学院,新疆医科大学附属肿瘤医院,新疆医科大学附属肿瘤医院肿瘤研究所,新疆医科大学中心实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(81660459)
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目的:在食管鳞癌细胞Eca109中建立自噬模型.方法:按照常规细胞培养方法,将Pmcheny-GFP-LC3质粒转染进入Eca109细胞,mcheny为红色荧光蛋白,GFP为绿色荧光蛋白,可示踪自噬体形成.加入浓度为50nmol/L自噬激活剂雷帕霉素,建立自噬模型.采用电镜观察雷帕霉素诱导后细胞中自噬小体的产生,激光共聚焦显微镜观察自噬发展的阶段,并对发生自噬行为的细胞进行计数.结果:雷帕霉素诱导后可见明显的自噬小体,激光共聚焦采图可见自噬细胞数量明显增多(P〈0.05).结论:1.在Eca109细胞中通
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