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建立了用反相高效液相色谱法同时测定化妆品中9种禁用四环素类抗生素。采用甲醇超声提取，Kromasil C18柱（250 mm×4.6 mm i.d.，5μm）分离测定。9种被测物在12 min内均得到良好的分离。在1-100μg/mL范围内均与其各自对应的峰面积呈良好线性关系（r≥0.9991），回收率在85.5%-105.7%之间，精密度RSD〈3.2%，该方法的检出限（S/N=3）为0.05-0.5μg/mL。该法可用于祛痘类化妆品中9种禁用四环素类抗生素的检测。