目的建立亲水作用色谱串联质谱法测定头发中的尼古丁和可替宁的方法。方法样品在氢氧化钠溶液中水解,二氯甲烷萃取,氮气吹干,流动相复融后注入色谱-质谱系统分析。采用亲水作用色谱柱分离,甲醇-0.1%氨水为流动相,电子喷雾电离-三重四极杆质谱完成定量检测。采用建立的方法测定602例孕妇头发样品、31例志愿者头发和尿样中尼古丁和可替宁含量。结果采用本实验建立的亲水作用液相色谱串联质谱法检测样品,尼古丁和可替宁在0.030～100.000μg/L范围内线性良好,方法检出限分别为0.007 6μg/g和0.004 4μg/g。日间和日内精密度小于10%。样品加标回收率为81.0%～102.0%。602例孕妇头发样品中非暴露二手烟孕妇头发中的尼古丁和可替宁质量浓度为0.020～0.260μg/g和0.004 8～0.069 0μg/g,二手烟暴露孕妇头发中的尼古丁和可替宁质量浓度为0.029～0.350μg/g和0.005 6～0.085 0μg/g。志愿者报告的吸烟状态与样品中的尼古丁和可替宁含量均具有相关性(P<0.05);暴露的吸烟支数与头发中尼古丁含量关系密切,两者具有线性关系。结论本研究建立的方法准确灵敏,适用于头发中尼古丁和可替宁检测。头发中的尼古丁水平可能是评估烟草暴露剂量的特定生物标志物。