微丝重组对细胞增值作用的研究

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用罗丹明-鬼笔环肽(rhodamine-phalloidin)显示微丝(microfilaments,MF)的荧光染色法对G期小鼠C3H10T1/2成纤维细胞向S期过渡过程中,MF结构的变化及MF重组对DNA合成的影响进行了研究,G期细胞在血清刺激1h后MF解聚,3h后重新组装,并恢复原来的分布。我们发现细胞松弛素B(cytochalasinB,CB)使MF解聚并与蛋白激酶C(proteinkinaseC,PKC)激活剂──佛波酯(phorbolester,TPA)同样可促进G期细胞提前进入S期,促进DNA合成,但TPA和CB的刺激作用必需依赖于血清的存在,而PKC抑制剂H7则阻断G期细胞进入S期,MF稳定剂phalloidin对DNA合成具有一定的抑制作用,实验结果表明,G期细胞向S期过渡的早期阶段存在MF重组过程,CB促使G细胞MF解聚并可促进DNA合成,提示MF重组是G期细胞向S期过渡的一个重要的早期事件。 Fluorescent staining of microfilaments (MF) with rhodamine-phalloidin showed that the MF structure was changed during the transition from C3H10T1 / 2 fibroblasts to S phase in group G mice and MF reorganization The effects of DNA synthesis were studied. G cells were depolymerized after 1 h of serum stimulation and reassembled after 3 h, and the original distribution was restored. We found that cytochalasin B (CB) depolymerizes MF and activates G-phase cells into S phase as well as activator of protein kinase C (PKC), phorbol ester (TPA), and promotes DNA However, the stimulation of TPA and CB must depend on the presence of serum, whereas the PKC inhibitor H7 blocked the G phase cells entering the S phase. The MF stabilizer phalloidin inhibited the DNA synthesis to a certain extent. The experimental results showed that G phase MF recombination occurs in the early stage of cell-to-S phase transition, CB promotes the decontamination of G cells and promotes DNA synthesis, suggesting that MF recombination is an important early event in the transition from G cells to S phase.
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