【摘 要】
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目的：克隆融合蛋白d-EGF成熟链基因,构建原核表达载体,并在大肠埃希菌（E.coli）表达体系中进行有效表达、分离纯化并鉴定其特异性。方法：以蛋白基因序列为基础,RT-PCR扩增人防御素
【机 构】
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蚌埠医学院,解放军第123医院检验病理科
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目的：克隆融合蛋白d-EGF成熟链基因,构建原核表达载体,并在大肠埃希菌（E.coli）表达体系中进行有效表达、分离纯化并鉴定其特异性。方法：以蛋白基因序列为基础,RT-PCR扩增人防御素-β和表皮生长因子基因,分别构建β-防御素-3（β-defensin-3）、EGF重组质粒,应用重组PCR方法,将EGF的DNA序列拼接到β-defensin-3 DNA序列的3＇端,将基因克隆入原核表达载体pET-SUMO,构建重组质粒pET-SUMO-d-EGF。采用PCR、测序等方法鉴定后转化E.coli BL21
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