地高辛素标记HCMV DNA探针的制备及应用

来源 :中华传染病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:amenking34875627
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采用随机引物法制备地高辛素标记HCMV DNAJ片段(AD169株)作为探针,建立了HCMV DNA班点杂交试验。实验结果表明探针特异性好,敏感性高,能检测到1Pg的DNA同源片段。探针不与单纯疱疹病毒I型(HSV-I)、单纯疱疹病毒II型(HSV-II)及未感染的人胚肺细胞的DNA发生杂交。与病毒分离法比较,地高辛素探针的敏感性为85.7%(6/7),特异性为92.3%(12/13),符合率为90%(18/20)。临床标本应用检测:患儿尿标本45份,正常托儿尿标本60份,HCMV DNA阳性率分别为20%和6.7%,患儿和供血者白细胞标本12和60份,阳性率分别为25%和48.3%。实验结果还表明地高辛素标记探针优于生物素标记探针,敏感性至少高10倍,性质稳定、背景清晰,是目前较为理想的非同位素探针标记物。

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