【摘 要】
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目的:利用慢病毒质粒构建细胞分裂周期蛋白25(CDC25)表达下调的黑色素瘤B16细胞,探讨CDC25C表达下调对黑色素瘤细胞自噬和迁移能力的影响.方法:利用TCGA可视化在线工具GEPIA数据库检测CDC25C在黑色素瘤中的表达;通过慢病毒质粒转染构建CDC25C表达下调的黑色素瘤B16细胞株,并以RT-qPCR技术确认其表达量;以RT-qPCR和Western blotting方法检测CDC25C表达下调对自噬相关分子p62、LC3及beclin1的影响;划痕修复实验观察CDC25C表达下调对B16细
【机 构】
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广西医科大学基础医学院,南宁 530021
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目的:利用慢病毒质粒构建细胞分裂周期蛋白25(CDC25)表达下调的黑色素瘤B16细胞,探讨CDC25C表达下调对黑色素瘤细胞自噬和迁移能力的影响.方法:利用TCGA可视化在线工具GEPIA数据库检测CDC25C在黑色素瘤中的表达;通过慢病毒质粒转染构建CDC25C表达下调的黑色素瘤B16细胞株,并以RT-qPCR技术确认其表达量;以RT-qPCR和Western blotting方法检测CDC25C表达下调对自噬相关分子p62、LC3及beclin1的影响;划痕修复实验观察CDC25C表达下调对B16细胞迁移能力的影响.结果:生物信息学分析发现CDC25C在黑色素瘤中高表达(P<0.05);成功构建CDC25C表达下调的B16细胞株;与对照组相比,CDC25C表达下调的B16细胞中自噬相关分子p62、LC3、beclin1 mRNA和蛋白表达量均增高(均P<0.05),细胞增殖迁移率降低(P<0.001).结论:CDC25C表达下调能激活黑色素瘤细胞自噬过程,并抑制细胞的迁移能力.
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