【摘 要】
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目的观察自主研发的抗NRP-1 b1/b2 IgG1型特异性单克隆抗体（NRP-1mAb）对胃癌细胞BGC-823迁移及侵袭的影响，并探讨其可能的作用机制。方法实验室制备NRP-1mAb，利用流式细胞术检测抗体纯度。在实验室保存胃癌细胞株BGC-823的培养液中加入不同浓度的NRP-1mAb进行培养，采用Transwell法观察12 h后BGC-823细胞的迁移、侵袭情况。利用蛋白印迹法分析NRP
【机 构】
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361003 厦门大学附属成功医院 解放军第一七四医院肿瘤治疗中心,361003 厦门大学附属成功医院医务处,361003 厦门大学附属成功医院 解放军第一七四医院肿瘤治疗中心,361003 厦门大学
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目的观察自主研发的抗NRP-1 b1/b2 IgG1型特异性单克隆抗体（NRP-1mAb）对胃癌细胞BGC-823迁移及侵袭的影响，并探讨其可能的作用机制。
方法实验室制备NRP-1mAb，利用流式细胞术检测抗体纯度。在实验室保存胃癌细胞株BGC-823的培养液中加入不同浓度的NRP-1mAb进行培养，采用Transwell法观察12 h后BGC-823细胞的迁移、侵袭情况。利用蛋白印迹法分析NRP-1mAb作用后相关信号蛋白磷酸化情况。
结果利用专利技术制备的NRP-1mAb在作用于胃癌细胞BGC-823 12 h后，能减少BGC-823迁移、侵袭的细胞数量。对照组（不加任何试剂）与给药组（NRP-1mAb 25、100、400 μg/ml）穿过基底膜的细胞数分别为（167±9）、（138±5）、（98±5）、（36±4）个，差异有统计学意义（F=22.6，P<0.01），穿过滤过膜的细胞数分别为（231±40）、（224±19）、（176±26）、（124±34）个，差异有统计学意义（F=26.63，P<0.01），其中100、400 μg/ml给药组分别与对照组比较，差异均有统计学意义（均P<0.001）。高浓度NRP-1mAb（100 μg/ml）作用BGC-823细胞10 min后细胞液中Akt磷酸化水平明显下降，30 min后很难检测到磷酸化Akt。
结论NRP-1mAb可能通过降低Akt磷酸化水平，抑制胃癌细胞BGC-823的迁移、侵袭，且与浓度呈正相关。
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