目的从临床分离1株耐β-内酰胺类铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)菌株,观察其体外耐β-内酰胺类抗菌药物后发生的细菌表面特征变化。方法从伤口分泌物中分离铜绿假单胞菌并采用K-B法进行药物敏感性实验,筛选出1株耐β-内酰胺类抗菌药物的菌株;通过革兰染色和原子力显微镜(atomic force microscope,AFM)观察K-B实验前后细菌形态和表面特征的变化。结果筛选出了1株耐β-内酰胺类抗菌药物的菌株,通过革兰染色和原子力显微镜观察到K-B实验后细菌菌体均变长,能达到K-B实验前的10倍,宽度略微瘦小,即长5.0～25.0μm,宽0.3～0.8μm,表现出L型的细菌形态;革兰阴性的染色特性未发生改变;在500 nm×500 nm的扫面面积下AFM观察到K-B实验后铜绿假单胞菌的表面孔洞增多,显示出粗糙的特征,通过地貌图(K-B实验前深度不大于10 nm,K-B实验后深度大于30 nm)和粗糙度参数分析,结果进一步证实该现象。结论 AFM能观察到K-B实验后铜绿假单胞菌的表面变得更加粗糙的特征,而革兰染色不能观察到这一改变;AFM扫描观察技术可用于细菌表面微观变化观察。