【摘 要】
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目的研究芍药苷(paeoniflorin,PF)对佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)大鼠关节滑膜成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS)内mTOR信号的影响。方法将大鼠分
【机 构】
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安徽科技学院食品药品学院; 安徽医科大学第四附属医院;
【基金项目】
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国家自然科学基金(No.81302783);安徽科技学院稳定人才项目(No.ZRC2014473);安徽科技学院优秀人才项目(No.XJYXRC201801);安徽省重点研究和研发计划(No.1804a0802218)资助
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目的研究芍药苷(paeoniflorin,PF)对佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)大鼠关节滑膜成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS)内mTOR信号的影响。方法将大鼠分为正常组、AA组、AA+PF100μg/mL组、AA+PF 200μg/mL组、AA+PF 400μg/mL组和AA+PBS组,除正常组外,其余各组大鼠均采用完全弗氏佐剂足跖注射法制备AA大鼠,AA+PF 100μg/mL组、AA+PF 200μg/mL组、AA+PF 400μg/mL组大鼠造模后向尾静脉注射剂量为0.1mL/200g体重PF,研究3个剂量PF对AA大鼠关节炎评分的影响。造模后第28天股动脉放血处死正常组和AA组大鼠,分离各组大鼠关节滑膜组织,培养FLS,将培养出的FLS分为正常组、AA组、AA+PF 1μg/mL、AA+PF 2μg/mL、AA+PF 4μg/mL组,通过Real time qPCR检测PF加药对AA大鼠FLS内mTOR表达的影响,Western blot检测PF对AA大鼠FLS磷酸化mTOR(p-mTOR)蛋白表达的影响,ELISA检测PF对AA大鼠FLS细胞因子白细胞介素(IL)-1、IL-6表达的影响,real time qPCR检测PF加药对AA大鼠FLS内MMP3表达的影响,向FLS转染mTOR过表达载体48h后再次检测IL-1、IL-6和MMP3的表达。结果 PF能够降低AA大鼠关节炎评分。PF加药后48h,与AA组FLS相比,AA大鼠FLS在PF为1、2、4μg/mL时mTOR表达均降低。与AA组FLS相比,AA大鼠FLS在PF为2μg/mL时p-mTOR蛋白表达量也降低。PF加药后48h,与AA组FLS相比,AA大鼠FLS在PF为1、2、4μg/mL时IL-1、IL-6、MMP3表达均降低。向AA+PF 2μg/mL组FLS转染mTOR过表达载体48h,与转染前相比,IL-1、IL-6、MMP3表达均升高。结论 PF可以改善AA大鼠病理,其机制可能与AA大鼠FLS内mTOR信号的抑制有关。
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