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利用高速逆流色谱法(HSCCC)对水飞蓟黄酮进行了分离。文中采用溶剂系统叔丁基甲基醚-甲醇-水体积比2∶0.8∶1的上相为固定相、下相为流动相进行逆流色谱分离,分离的部分组分用制备型HPLC分离,达到了6个黄酮类化合物的全分离。结果表明:1次HSCCC分离可进样500mg,分离得到21mg水飞蓟亭、53mg水飞蓟宁、213mg水飞蓟宾和97mg异水飞蓟宾;30mg水飞蓟宾和30mg异水飞蓟宾用制备HPLC分离分配得到8.1mg水飞蓟宾A和21.3mg水飞蓟宾B、24.2mg异水飞蓟宾A和4.4mg异水飞蓟宾B。6个化合物组经核磁共振(NMR)鉴定了结构。因此高速逆流色谱-制备HPLC联合法是一种较好的水飞蓟黄酮完全分离方法。