【摘 要】
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目的 研究香烟对非小细胞肺癌(NSCLC) NCI-H520细胞株增殖的影响以及巨噬细胞在此过程中的作用.方法 采用Transwell Inserts细胞培养室共培养人类原代巨噬细胞或分化为巨噬细胞的人类单核巨噬细胞株U937细胞和NCI-H520细胞.应用免疫印迹法和凝胶电泳迁移实验检测NFκ B通路的激活；应用NF κ B-p65 shRNA干扰质粒抑制U937细胞p65表达；利用BrdU E
【机 构】
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200065上海,同济大学附属同济医院检验科,上海市普陀区人民医院药剂科,200065上海,同济大学附属同济医院检验科,200065上海,同济大学附属同济医院检验科
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目的 研究香烟对非小细胞肺癌(NSCLC) NCI-H520细胞株增殖的影响以及巨噬细胞在此过程中的作用.方法 采用Transwell Inserts细胞培养室共培养人类原代巨噬细胞或分化为巨噬细胞的人类单核巨噬细胞株U937细胞和NCI-H520细胞.应用免疫印迹法和凝胶电泳迁移实验检测NFκ B通路的激活；应用NF κ B-p65 shRNA干扰质粒抑制U937细胞p65表达；利用BrdU ELISA分析香烟抽提物(CSE)对NCI-H520细胞的促增殖效应；ELISA法分析肿瘤坏死因子α(TNFα)和IL-6的释放.结果 共培养及香烟刺激增强了人类巨噬细胞的NFκ B-p65的入核以及同靶基因结合的活力.与对照组相比,NCI-H520细胞经不同浓度CSE单独处理,并没有发现肺癌细胞增殖明显加快(P＞0.05)；而经过与人类原代巨噬细胞或分化为巨噬细胞的U937细胞共培养4d,巨噬细胞明显促进NCI-H520细胞的增殖(P＜0.01),且CSE的刺激显著增强这一效应(P＜0.01).NF κ B-p65 shRNA干扰质粒明显抑制了U937细胞的NFκ B-p65表达,抑制了NFκB通路的激活,减弱了CSE对NCI-H520细胞增殖的影响(P＜0.01),同时也抑制了炎性因子IL-6和TNF释放(P＜0.01).结论 香烟通过巨噬细胞的中介促进了NCI-H520细胞的增殖.采用RNA干扰技术阻断巨噬细胞的NFκB通路显著地抑制了香烟促进肺癌细胞的增殖,削弱香烟引起的巨噬细胞的炎症因子释放可能是其作用机制。
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