【摘 要】
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目的 探讨HIV-1 V2区175位变异对于V3中和抗体与病毒结合能力的影响.方法 使用真核细胞表达质粒分别串联HIV-1野生型和突变型的env基因和绿色荧光蛋白GFP,并转染293T细胞,使g
【机 构】
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中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所,日本熊本大学艾滋病中心
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目的 探讨HIV-1 V2区175位变异对于V3中和抗体与病毒结合能力的影响.方法 使用真核细胞表达质粒分别串联HIV-1野生型和突变型的env基因和绿色荧光蛋白GFP,并转染293T细胞,使gp120表达到293T细胞的表面,并根据GFP荧光来检出转染成功细胞.然后使用免疫染色和双荧光流式细胞仪检测几种常见V3区中和抗体对野生型和突变型gp120的结合力.结果 L175P突变使表达在293T细胞表面的gp120三聚体与3种V3区特异性抗体结合的荧光强度差异有统计学意义,与阴性对照的荧光强度分布差异有统计学意义,图形的位置和峰值均有变化,平均荧光强度MFI显著升高;而表达野生株gp120三聚体的293T细胞与V3抗体作用后,曲线与阴性对照的荧光强度分布基本重叠,MFI 基本相同.结论 提示V2区突变可以提升病毒对V3抗体中和作用的敏感性.
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