探讨微小RNA-145(miR-145)、Six1在胃癌组织及胃癌细胞株中的表达，miR-145靶向Six1对人胃癌细胞株侵袭的影响及分子机制。
方法选取2017年1月至11月长沙市第四医院经胃镜＋病理组织学确诊的进展期胃癌患者60例，采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-145 mRNA及Six1在60例胃癌及配对癌旁组织中的表达，并分析其相关性。在胃癌细胞株MKN-45、BGC-823和SGC-7901中转染miR-145模拟物，qRT-PCR法检测3种胃癌细胞株中miR-145 mRNA相对水平，选取miR-145 mRNA表达水平最高的SGC-7901胃癌细胞株行后续实验。设模拟物组(转染miR-145模拟物)、NC组(转染miR-145阴性对照)和空载体组(不加入任何寡聚核苷酸)，采用Transwell实验检测胃癌细胞侵袭能力；小管形成实验验证促血管形成能力；Western blotting法检测胃癌细胞株SGC-7901下游蛋白Six1、上皮钙黏着蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(vimentin)表达水平。MirTrap系统及荧光素酶报告实验验证miR-145是否靶向Six1基因。
结果胃癌组织及癌旁组织中miR-145 mRNA分别为0.579±0.086、1.009±0.121，差异有统计学意义(t＝－22.498，P<0.001)；Six1分别为2.516±0.208、1.041±0.227，差异有统计学意义(t＝37.119，P<0.001)；miR-145 mRNA与Six1表达呈负相关(r＝－0.728，P<0.001)。过表达miR-145后，模拟物组、NC组和空载体组中，胃癌细胞穿膜细胞数分别为48.550±3.716、82.800±3.797、87.467±8.023，差异有统计学意义(F＝87.789，P<0.001)，模拟物组与NC组及空载体组相比差异均有统计学意义(均P<0.001)。模拟物组、NC组和空载体组中，人脐静脉内皮细胞的成管数分别为24.333±1.211、34.167±2.041、36.500±3.209，差异有统计学意义(F＝47.103，P<0.001)，模拟物组与NC组及空载体组相比差异均有统计学意义(均P<0.001)。模拟物组、NC组和空载体组中，胃癌细胞SGC-7901中Six1表达量分别为1.392±0.072、2.426±0.099、2.371±0.079，差异有统计学意义(F＝289.517，P<0.001)，模拟物组与NC组及空载体组相比差异均有统计学意义(均P<0.001)；模拟物组、NC组和空载体组中，E-cadherin表达量分别为4.001±0.132、2.714±0.181、2.653±0.218，差异有统计学意义(F＝106.572，P<0.001)，模拟物组与NC组及空载体组相比差异均有统计学意义(均P<0.001)；模拟物组、NC组和空载体组中，vimentin表达量分别为1.634±0.132、3.349±0.102、3.501±0.185，差异有统计学意义(F＝389.032，P<0.001)，模拟物组与NC组及空载体组相比差异均有统计学意义(均P<0.001)。MirTrap系统验证模拟物组、NC组和空载体组中靶标Six1 mRNA水平分别为1.101±0.097、0.582±0.037、0.573±0.032，差异有统计学意义(F＝138.922，P<0.001)，模拟物组与NC组及空载体组相比差异均有统计学意义(均P<0.001)。荧光素酶报告实验Six1野生型重组载体组双荧光比值，模拟物组、NC组和空载体组分别为7.324±0.415、10.755±0.481、10.430±0.309，差异有统计学意义(F＝129.345, P<0.001)，模拟物组与NC组及空载体组相比差异均有统计学意义(均P<0.001)。而模拟物组、NC组和空载体组Six1突变型重组载体组双荧光比值分别为10.938±0.091、11.077±0.126、11.028±0.205，差异无统计学意义(F＝1.318，P＝0.297)。MirTrap系统及荧光素酶报告实验验证miR-145靶向Six1基因。
结论miR-145 mRNA及Six1在胃癌及癌旁组织中差异表达，呈负相关；miR-145通过靶向Six1基因抑制胃癌细胞侵袭、血管形成及上皮间质转化。