【摘 要】
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目的 建立生存素(Survivin)基因慢病毒载体和大鼠皮下骨肉瘤动物模型,观察Survivin基因慢病毒载体局部治疗大鼠皮下骨肉瘤的疗效.方法 选取60只大鼠,采用注射法将骨肉瘤细胞
【机 构】
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山东省肿瘤医院骨与软组织肿瘤科, 济南,250117
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目的 建立生存素(Survivin)基因慢病毒载体和大鼠皮下骨肉瘤动物模型,观察Survivin基因慢病毒载体局部治疗大鼠皮下骨肉瘤的疗效.方法 选取60只大鼠,采用注射法将骨肉瘤细胞种植在裸鼠下肢胫骨骨髓腔内,每天注射1次,连续注射4周,建立大鼠皮下骨肉瘤动物模型,将骨肉瘤模型裸鼠随机分为Survivin基因慢病毒载体组、空白载体组和空白对照组,分别于胫骨骨肉瘤局部注射Survivin-小干扰RNA(siRNA)的慢病毒载体50μl、空白病毒载体和生理盐水各1次,4周后观察抑瘤率.分别于治疗前、治疗后(第2、7、14、28天)取原位肿瘤,行病理切片检查,同时采大鼠模型的血清检测其碱性磷酸酶(ALP)水平.结果 (1)肿瘤生长曲线示慢病毒载体组骨肉瘤生长速度明显慢于空白对照组和空白载体组(P<0.05),慢病毒载体组、空白载体组抑瘤率分别为45.12%、8.81%;慢病毒载体组肿瘤体积明显小于空白对照组和空白载体组(P<0.01).(2)光镜下:Survivin基因慢病毒载体治疗后2d可见骨肉瘤局部形态尚保持完整,瘤区表皮呈暗紫色,下肢水肿较前减轻.治疗7d后骨肉瘤坏死脱落,局部红肿充血带明显消退.治疗14 d后,大鼠胫骨骨肉瘤坏死组织已开始修复,骨肉瘤边缘坏死处有结痂.(3)电镜下:Survivin基因慢病毒载体治疗前,大鼠胫骨骨肉瘤细胞大小不一,大量异形核,核膜不规则,异染色质边集,核浆比增大.经Survivin基因慢病毒载体治疗骨肉瘤14 d后,可见骨肉瘤细胞破坏明显,细胞核膜不完整,核破裂或溶解.(4)骨肉瘤大鼠模型,ALP水平与未治疗组比较差异有统计学意义(P<0.01).经过Survivin基因慢病毒载体治疗后的大鼠模型,ALP水平有所降低,但直到28 d后,其ALP水平仍高于正常水平(P<0.05).结论 慢病毒载体介导的Survivin-siRNA可显著抑制大鼠胫骨骨肉瘤的生长.
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