【摘 要】
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目的 以体外分离小鼠骨髓血管周间充质祖细胞为研究对象，探讨5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil, 5-FU）对血管周造血龛的损伤及其机制。方法 胶原酶消化分离提取C57BL/6J小鼠骨髓血管周间充质祖细胞，体外培养；琼脂糖凝胶电泳检测造血龛特异性基因表达，台盼蓝计数活细胞，CCK-8检测细胞增殖，Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡，β-半乳糖苷酶染色检测细胞衰老，酶学法检测丙二醛MD
【机 构】
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重庆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室,干细胞与组织工程研究室
【基金项目】
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重庆市自然科学基金面上项目（No cstc2021jcyj-msxmX0669）；
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目的 以体外分离小鼠骨髓血管周间充质祖细胞为研究对象，探讨5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil, 5-FU）对血管周造血龛的损伤及其机制。方法 胶原酶消化分离提取C57BL/6J小鼠骨髓血管周间充质祖细胞，体外培养；琼脂糖凝胶电泳检测造血龛特异性基因表达，台盼蓝计数活细胞，CCK-8检测细胞增殖，Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡，β-半乳糖苷酶染色检测细胞衰老，酶学法检测丙二醛MDA和超氧化物歧化酶SOD水平，成骨成脂诱导分化和成骨相关基因qRT-PCR实验检测细胞成骨与成脂分化潜能，qRT-PCR检测造血因子基因表达。建立造血细胞与血管周间充质祖细胞共培养体系，进行基质细胞-造血细胞间黏附分子及信号分子检测，造血细胞活性、氧化还原指标以及β-半乳糖苷酶特异性细胞衰老检测。结果 5-FU导致血管周间充质祖细胞同时发生凋亡和衰老，抑制细胞增殖，氧化应激导致细胞成骨/成脂分化失衡，下调造血因子SCF、CXCL12、G-CSF转录，减弱与造血细胞间VLA-4/VCAM-1、 ICAM-1/LFA1黏附作用、削减TPO/MPL、Ang-1/Tie-2信号作用，导致造血细胞发生氧化应激，诱发细胞衰老。结论 5-FU诱导血管周间充质祖细胞氧化损伤，间接引起造血细胞氧化应激性衰老。
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