【摘 要】
：
P58IPK(58 kD inhibitor of PKR)作为宿主细胞分子伴侣蛋白,在调节机体抗病毒反应和免疫应答方面发挥着重要作用。本研究拟克隆猪(Sus scrofa) P58IPK基因CDS序列并构建其原
【机 构】
：
玉林师范学院生物与制药学院; 广西农产资源化学与生物技术重点实验室;
【基金项目】
：
国家自然科学基金(No.31860708);广西自然科学基金(No.2017GXNSFBA198025)
论文部分内容阅读
P58IPK(58 kD inhibitor of PKR)作为宿主细胞分子伴侣蛋白,在调节机体抗病毒反应和免疫应答方面发挥着重要作用。本研究拟克隆猪(Sus scrofa) P58IPK基因CDS序列并构建其原核表达载体,纯化P58IPK蛋白并以此为抗原制备多克隆抗体,以期为后续研究猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)与宿主之间的互作关系提供基础材料。根据猪P58IPK全基因序列(GenBank No. HQ287801.1)设计引物,以反转录PCR (reverse transcription PCR, RT-PCR)方法扩增P58IPK基因CDS序列(去除信号肽序列),经NdeⅠ/XbaⅠ双酶切后定向克隆至原核表达载体pCzn1;将其转化Arctic-Express TM大肠杆菌(Escherichia coli)进行诱导表达;表达产物经变性、复性及His-Band Ni+层析柱亲和纯化,将纯化产物HisP58IPK重组蛋白作为抗原免疫兔子(Oryctolagus cuniculus)制备多克隆抗体。抗体纯化后,分别利用间接ELISA和Western blot方法对其效价和特异性进行检测。结果显示,克隆所得的猪P58IPK基因CDS序列长度为1 425 bp,表达产物His-P58IPK重组蛋白主要以包涵体形式存在,分子量约为54.44 kD;由此蛋白制备的多抗效价在1∶512 000以上,能够特异性识别目标蛋白(包括重组蛋白His-P58IPK和猪P58IPK蛋白)。本研究成功克隆了猪P58IPK多克隆抗体,可为深入研究猪P58IPK蛋白功能和PCV2病毒与宿主之间的互作机制提供基础资料。
其他文献
我国地大物博,同时处于不同的地形中,针对于多山的地区比较多,这些山地城镇占据了全国总城镇的一半作用。随着城市现代化建设的发展,在山地区域中建设别墅小区是以后城市化建
在美联储加息进程的影响下，目前全球主要经济体央行出现了政策同步的初步迹象，均无意继续放宽货币政策。全球经济增长状况的逐步改善，正在为货币政策回归正常化提供有力支撑。$$
梭梭适应性极强,具有抗旱、抗寒、耐热、耐碱的特性,是荒漠、半荒漠地区优良的固沙造林树种。为调整农业产业结构,发展沙产业,兵团第二师三十八团通过滴灌节水技术,在沙地栽
联芳基阻旋手性化合物作为一类重要的轴手性化合物,广泛分布于天然产物和活性生物分子中,同时也是众多优势配体或催化剂的核心骨架,结构上分为非桥链和桥链的联芳基轴手性化
《海交史研究》2003年第一期发表了张小夫先生一文，题为“《光明之城》伪书考存疑——兼与黄时鉴教授商榷”。文中用了三页多篇幅批驳黄先生“Sinim非中国”之说。由于张文提
高铁与其他铁路交通工具相比,在速度以及服务质量上均具有明显优势,为维持及进一步提升其自身优势,需要不断加强高铁工程施工管理。高铁工程施工管理涉及多个项目,包括人员管
Aurora蛋白激酶是一类在细胞增殖过程起重要作用的丝/苏氨酸蛋白激酶,在人体中有Aurora A、Aurora B和Aurora C三个家族成员。Aurora蛋白激酶参与细胞有丝分裂过程,其异常表
由于我国政治体制改革的不断推进以及计算机技术和网络技术的快速发展,传统公共档案馆工作模式正面临着新的机遇和挑战。近年来,档案馆越发重视将社会力量参与引入到日常的档案工作中,以缓解长期以来档案部门人少事多的矛盾。此举日渐推进档案馆繁荣向前的同时,也一定程度上满足了社会参与档案工作多方面的诉求。文章主要探究档案公共服务以前的业务环节,即公共档案馆资源建设阶段中的社会力量参与,并且着重探讨社会力量参与的
分析了江苏沿海地区小城镇发展的现状,指出了发展中存在的问题.在此基础上,进一步提出了江苏沿海小城镇发展生态化的对策.
在施工项目管理中施工合同管理是相当重要的一部分,不仅影响着施工工程的整体质量,同时也影响着施工工程的施工进度与施工成本,如果在工程施工的过程中,施工单位未做好施工合