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[摘要] 目的 了解新疆地区汉、哈、维、蒙古、回族乙性肝炎病毒感染者血清标志物和与Pre2Ag、PreSAb之间的关系。方法 应用乙性肝炎病毒?PreS2Ag、PreS2Ab酶联免疫试剂，检测了新疆地区318例不同民族HBV感染者中的PreS2Ag、PreS2Ab。 结果 在新疆地区129例HBeAg（+）组中，PreS2Ag阳性119例，PreS2Ab阳性10例，阳性率分别为92.25%、8.40%；在189例Anti-HBe（+）组中，PreS2Ag阳性148例，PreS2Ab阳性14例，阳性率分别为78.31%、7.41%。 结论 在新疆的各民族HBV感染者HBeAg（+）和Anti-HBe（+）组中的Pre2Ag的阳性率，经统计（x2=8.583，P<0.05）差异有统计学意义。在HBeAg（+）组中，PreS2Ag、preS2Ab的阳性率各有不同，各民族之间，经统计（x2=3.84，P>0.05），差异无统计学意义。在Anti-HBe（+）中，汉族与哈、维族的阳性率比较（x2=7.88、14.43，P<0.05）。汉族与回族PreS2Ab比较（x2=4.64，P<0.05），差异有统计学意义。
[关键词]新疆地区；各民族；乙型肝炎；前S2抗原；抗-PreS2
[中图分类号] R446.6 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2013）21-09-03
乙型病毒性肝炎（乙肝）具有较高的感染性，在我国具有较高的感染率。新疆地区是个少数民族聚居的地方，各民族大杂居，小聚居的居住特点，造就了生活习惯和风俗的不同。我国新疆地区乙肝的感染率较高，PreS2Ag、PreS2Ab与乙肝病毒复制和清除有明显的伴随关系[1]，PreS2Ab在新疆不同民族中的阳性率及其表达特点是否具有其民族特异性未见相关报道。本研究收集了新疆地区五个民族共319例乙肝病毒感染者血清，用ELISA法分成两中血清学标志物模式HBeAG+组：HBsAg+、HBeAg+、HBcAb+；Anti-HBe+组：HBsAg+、HBeAb+、
HBcAb+，并分别进行了PreS2Ag、PreS2Ab检测。
1 实验材料与方法
1.1 材料
1.1.1 HBV感染者血清标本的族别分布情况见表1，共计319例。
1.1.2 检测试剂 前S2抗原（PreS2Ag），抗-PreS2（PreS2Ab），ELISA试剂盒由北京大学肝炎试剂公司提供，批号：200501205，20050205。
1.1.3 乙型病毒性肝炎病毒HBsAg、Anti-HBs、HBeAg、Anti-HBs、Anti-HBs试剂盒（上海申友生物工程公司，20060403）。
1.1.4 前处理使用酶标仪，洗板机。测定使用SLAN全自动荧光PCR监测系统。
1.2 检测方法
1.2.1 血清PreS2Ag、PreS2Ab的检测方法 在450nm波长下，使用MK3酶标仪空白调零，测定各空白OD值，PreS2Ag的临界值=0.15+阴性对照平均值；PreS2Ag阴性：标本OD值<临界值，PreS2Ag阳性：标本OD值>临界值。
1.2.2 PreS2Ab检测方法 根据公式（阴性对照平均OD值-样本OD值）/（阴性对照平均OD值-阳性对照平均OD值）×100%，计算PreS2Ab抑制率。
判定依据：（1）抑制率<35%为阴性；（2）35%<抑制率<50%为可疑；重复试验，结果仍为35%<抑制率<50%，判阴性；（3）抑制率≥50%为阳性。
1.3 统计学分析
统计分析采用的是SPSS12.0，以阳性率进行x2检验，P<0.05为差异具有统计学意义。
2 结果
本研究共收集了新疆地区五个民族（汉族、维族、哈族、回族、蒙古族）共319例乙肝病毒感染者血清，采用ELISA法将各民族HBV阳性血清分成HBeAg（+）组和Anti-HBe（+）组，分别进行了PreS2Ag/PreS2Ab检测。血清标本均经过3次测定，并对OD值在1.30左右的PreS2Ab血清标本进行不同批次试剂的测定。结果表明，在各民族HBeAg（+）组129例中，PreS2Ag标志阳性119例，PreS2Ab阳性10例；在各民族Anti-HBe（+）组190例中，PreS2Ag标志阳性175例，PreS2Ab阳性15例。测定结果见表2，在HBeAg（+）和Anti-HBe+组中的PreS2Ag的检出率，经统计，（x2=8.54，P<0.01）差异具有统计学意义；在Anti-HBe+组中，汉族与维族、哈族、回族PreS2Ab的阳性率比较，（x2=5.56、5.2、7.17、P<0.05），差异具有统计学意义。
3 讨论
乙型肝炎是血液传播性疾病，主要经血（如不安全注射史等）、母婴传播及性传播，皮肤黏膜破损传播也有一定比例，血液制品现已严格控制，传播可能性大大减少，不规范输血及血制品时才有发生。医务人员工作中的意外暴露也不容忽视。乙型肝病炎病毒（HBV）的表面抗原（HBsAg）包括前S、前S1、前S2三种蛋白，分别为S区、前S1区、前S2区编码[2]。目前，用合成肽分析已证实HBV前S1是吸附于靶细胞的配体，前S2在吸附中起辅助作用。HBV对末梢血单核细胞的吸附主要涉及前S2。前S1和前S2的主要临床意义在于：（1）作为病毒复制的指标；（2）可作为对药物疗效评价的参考指标之一。前S1和前S2抗体见于乙型肝炎急性期和恢复早期，表示病毒正在或已被清除，预后好。在HBsAg携带者及慢性乙型肝炎患者血清中均查不到前S抗体，前S抗体迟迟不出现，意味预后较差。研究表明PreS2Ag在HBV感染肝细胞的机制、机体的免疫反应和临床诊断上有着比较重要的意义[3-4]。PreS2Ag、PreS2Ab是HBV感染、毒复制及乙肝患者诊断治疗和预防后的一个新的血清学标志物，PreS2Ag标志阳性检出率92.25%，与游景韩等[4]报道的结果基本相符。我们通过对五个民族乙肝感染者血清的HBeAg（+）和Anti-HBe（+）组中PreS2Ag的研究，发现各民族在Anti-HBe（+）组中PreS2Ag标志阳性190例，阳性率为77.89%，比HBeAg（+）组中PreS2Ag阳性率要低，两组中的PreS2Ag阳性率经统计，（x2=8.58，P<0.01），差异具有统计学意义；但HBV在Anti-HBe+组的模式中仍存在病毒的复制，故不能简单的认为该模式为恢复期或是病毒复制停止，在各民族之间在HBeAg+组中，PreS2Ag/PreS2Ab之间（x2=3.84，P>0.05），差异无统计学意义；在Anti-HBe+组中，通过对汉族与维族、哈族、回族之间的PreS2Ab的阳性率比较，（x2=7.88、14.43，P<0.01），差异具有统计学意义。 PreS2Ab是一种保护性抗体，并与抗HBe密切相关，PreS2Ab的出现预示病情好转和正在恢复[5]。通过对表2 PreS2Ab阳性病例分析，发现的结果与何有成等[6]报道的结论基本一致，即PreS2Ab的出现与HBeAg（+）、Anti-HBe（+）、HBV-DNA（-）、（+）的存在无明确的伴随关系。提示在HBV的慢性感染中，PreS2Ab阳性的出现，并不一定意味病情的恢复和HBV-DNA的清除，由于病例较少，PreS2Ab的临床意义还有待于进一步的深入研究。在Anti-HBe（+）组中，汉族与维族、哈族、回族之间PreS2Ab的阳性率具有统计学意义。这与HBV病毒在体内的清除过程、新疆地区种族差异、饮食习惯等均有一定的关系，有待于进一步的研究。
[参考文献]
[1] 张阳根，徐忠玉，谢志雄，等.乙性肝炎患者前PreS2Ag/PreS2Ab测定的临床意义[J].现代诊断与治疗，2004，15（1）：28.
[2] Milich DR，George B，Robert A，et al.Enhanced immunogenicity to the pre-S region of hepatit is B surface antigen[J].Science，1985，228：1195.
[3] 杨欣，林顺芝.乙性肝炎前抗原研究现状与展望[J].国外医学（预防、诊断、治疗用生物制品分册），1994，17：57.
[4] Itoh Y，Takai E，Ohnuma H，et al.A synthetic peptide vaccine involving the product of the pre-S（2）region of hepatitis B virus DNA；protect ive efficacy in chimpanezz[J].Proc Natl Acad Sci USA，1986，93：9714.
[5] 游景韩.HBV前S2抗原/抗体与其病毒标志物的关系[J].现代诊断与治疗，2001，12（4）：202.
[6] 何有成，姚集鲁，陆玮伦，等.乙型肝炎病毒前S2抗原和前S2抗体检测及临床意义[J].临床肝胆病杂志，1991，4（7）：194-197.
（收稿日期：2013-07-24）
[关键词]新疆地区；各民族；乙型肝炎；前S2抗原；抗-PreS2
[中图分类号] R446.6 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2013）21-09-03
乙型病毒性肝炎（乙肝）具有较高的感染性，在我国具有较高的感染率。新疆地区是个少数民族聚居的地方，各民族大杂居，小聚居的居住特点，造就了生活习惯和风俗的不同。我国新疆地区乙肝的感染率较高，PreS2Ag、PreS2Ab与乙肝病毒复制和清除有明显的伴随关系[1]，PreS2Ab在新疆不同民族中的阳性率及其表达特点是否具有其民族特异性未见相关报道。本研究收集了新疆地区五个民族共319例乙肝病毒感染者血清，用ELISA法分成两中血清学标志物模式HBeAG+组：HBsAg+、HBeAg+、HBcAb+；Anti-HBe+组：HBsAg+、HBeAb+、
HBcAb+，并分别进行了PreS2Ag、PreS2Ab检测。
1 实验材料与方法
1.1 材料
1.1.1 HBV感染者血清标本的族别分布情况见表1，共计319例。
1.1.2 检测试剂 前S2抗原（PreS2Ag），抗-PreS2（PreS2Ab），ELISA试剂盒由北京大学肝炎试剂公司提供，批号：200501205，20050205。
1.1.3 乙型病毒性肝炎病毒HBsAg、Anti-HBs、HBeAg、Anti-HBs、Anti-HBs试剂盒（上海申友生物工程公司，20060403）。
1.1.4 前处理使用酶标仪，洗板机。测定使用SLAN全自动荧光PCR监测系统。
1.2 检测方法
1.2.1 血清PreS2Ag、PreS2Ab的检测方法 在450nm波长下，使用MK3酶标仪空白调零，测定各空白OD值，PreS2Ag的临界值=0.15+阴性对照平均值；PreS2Ag阴性：标本OD值<临界值，PreS2Ag阳性：标本OD值>临界值。
1.2.2 PreS2Ab检测方法 根据公式（阴性对照平均OD值-样本OD值）/（阴性对照平均OD值-阳性对照平均OD值）×100%，计算PreS2Ab抑制率。
判定依据：（1）抑制率<35%为阴性；（2）35%<抑制率<50%为可疑；重复试验，结果仍为35%<抑制率<50%，判阴性；（3）抑制率≥50%为阳性。
1.3 统计学分析
统计分析采用的是SPSS12.0，以阳性率进行x2检验，P<0.05为差异具有统计学意义。
2 结果
本研究共收集了新疆地区五个民族（汉族、维族、哈族、回族、蒙古族）共319例乙肝病毒感染者血清，采用ELISA法将各民族HBV阳性血清分成HBeAg（+）组和Anti-HBe（+）组，分别进行了PreS2Ag/PreS2Ab检测。血清标本均经过3次测定，并对OD值在1.30左右的PreS2Ab血清标本进行不同批次试剂的测定。结果表明，在各民族HBeAg（+）组129例中，PreS2Ag标志阳性119例，PreS2Ab阳性10例；在各民族Anti-HBe（+）组190例中，PreS2Ag标志阳性175例，PreS2Ab阳性15例。测定结果见表2，在HBeAg（+）和Anti-HBe+组中的PreS2Ag的检出率，经统计，（x2=8.54，P<0.01）差异具有统计学意义；在Anti-HBe+组中，汉族与维族、哈族、回族PreS2Ab的阳性率比较，（x2=5.56、5.2、7.17、P<0.05），差异具有统计学意义。
3 讨论
乙型肝炎是血液传播性疾病，主要经血（如不安全注射史等）、母婴传播及性传播，皮肤黏膜破损传播也有一定比例，血液制品现已严格控制，传播可能性大大减少，不规范输血及血制品时才有发生。医务人员工作中的意外暴露也不容忽视。乙型肝病炎病毒（HBV）的表面抗原（HBsAg）包括前S、前S1、前S2三种蛋白，分别为S区、前S1区、前S2区编码[2]。目前，用合成肽分析已证实HBV前S1是吸附于靶细胞的配体，前S2在吸附中起辅助作用。HBV对末梢血单核细胞的吸附主要涉及前S2。前S1和前S2的主要临床意义在于：（1）作为病毒复制的指标；（2）可作为对药物疗效评价的参考指标之一。前S1和前S2抗体见于乙型肝炎急性期和恢复早期，表示病毒正在或已被清除，预后好。在HBsAg携带者及慢性乙型肝炎患者血清中均查不到前S抗体，前S抗体迟迟不出现，意味预后较差。研究表明PreS2Ag在HBV感染肝细胞的机制、机体的免疫反应和临床诊断上有着比较重要的意义[3-4]。PreS2Ag、PreS2Ab是HBV感染、毒复制及乙肝患者诊断治疗和预防后的一个新的血清学标志物，PreS2Ag标志阳性检出率92.25%，与游景韩等[4]报道的结果基本相符。我们通过对五个民族乙肝感染者血清的HBeAg（+）和Anti-HBe（+）组中PreS2Ag的研究，发现各民族在Anti-HBe（+）组中PreS2Ag标志阳性190例，阳性率为77.89%，比HBeAg（+）组中PreS2Ag阳性率要低，两组中的PreS2Ag阳性率经统计，（x2=8.58，P<0.01），差异具有统计学意义；但HBV在Anti-HBe+组的模式中仍存在病毒的复制，故不能简单的认为该模式为恢复期或是病毒复制停止，在各民族之间在HBeAg+组中，PreS2Ag/PreS2Ab之间（x2=3.84，P>0.05），差异无统计学意义；在Anti-HBe+组中，通过对汉族与维族、哈族、回族之间的PreS2Ab的阳性率比较，（x2=7.88、14.43，P<0.01），差异具有统计学意义。 PreS2Ab是一种保护性抗体，并与抗HBe密切相关，PreS2Ab的出现预示病情好转和正在恢复[5]。通过对表2 PreS2Ab阳性病例分析，发现的结果与何有成等[6]报道的结论基本一致，即PreS2Ab的出现与HBeAg（+）、Anti-HBe（+）、HBV-DNA（-）、（+）的存在无明确的伴随关系。提示在HBV的慢性感染中，PreS2Ab阳性的出现，并不一定意味病情的恢复和HBV-DNA的清除，由于病例较少，PreS2Ab的临床意义还有待于进一步的深入研究。在Anti-HBe（+）组中，汉族与维族、哈族、回族之间PreS2Ab的阳性率具有统计学意义。这与HBV病毒在体内的清除过程、新疆地区种族差异、饮食习惯等均有一定的关系，有待于进一步的研究。
[参考文献]
[1] 张阳根，徐忠玉，谢志雄，等.乙性肝炎患者前PreS2Ag/PreS2Ab测定的临床意义[J].现代诊断与治疗，2004，15（1）：28.
[2] Milich DR，George B，Robert A，et al.Enhanced immunogenicity to the pre-S region of hepatit is B surface antigen[J].Science，1985，228：1195.
[3] 杨欣，林顺芝.乙性肝炎前抗原研究现状与展望[J].国外医学（预防、诊断、治疗用生物制品分册），1994，17：57.
[4] Itoh Y，Takai E，Ohnuma H，et al.A synthetic peptide vaccine involving the product of the pre-S（2）region of hepatitis B virus DNA；protect ive efficacy in chimpanezz[J].Proc Natl Acad Sci USA，1986，93：9714.
[5] 游景韩.HBV前S2抗原/抗体与其病毒标志物的关系[J].现代诊断与治疗，2001，12（4）：202.
[6] 何有成，姚集鲁，陆玮伦，等.乙型肝炎病毒前S2抗原和前S2抗体检测及临床意义[J].临床肝胆病杂志，1991，4（7）：194-197.
（收稿日期：2013-07-24）