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在pH1．64的C1ttrk-Lubs缓冲溶液中，牛血清白蛋白与酸性黄作用时导致吸收光谱发生变化，在532nm附近吸光度明显降低，而在424nm附近吸光度则呈增强趋势，其｜△A｜^-1与cp^-1呈良好线性。本文系统研究了酸性黄与蛋白质的作用机理及实验条件对酸性黄与蛋白质结合反应的影响，探讨了蛋白质与酸性黄之间的作用力。本法应用于人尿中总蛋白的测定，与经典的考马斯亮蓝G-250法结果一致。