【摘 要】
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目的建立简便、可靠、高效的体外分离培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的方法。方法利用2型胶原蛋白酶消化处理脐带分离HUVEC,采用内皮细胞培养基(ECM)进行培养。相差倒置显微镜
【机 构】
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新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院,新疆心血管病研究重点实验室; 新疆医科大学第一附属医院心脏中心;
【基金项目】
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国家自然科学基金(81160026)
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目的建立简便、可靠、高效的体外分离培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的方法。方法利用2型胶原蛋白酶消化处理脐带分离HUVEC,采用内皮细胞培养基(ECM)进行培养。相差倒置显微镜观察细胞形态,免疫荧光技术检测冯·维勒布兰德因子(v WF)的表达,流式细胞术检测细胞表面CD31的水平鉴定细胞的纯度,体外成管实验检测冻存后内皮细胞的功能。结果成功分离培养出纯度高、活性好的HUVEC。原代HUVEC分离1周即可汇合成单层,细胞呈典型的鹅卵石状排列,免疫荧光技术证明细胞广泛表达v WF、CD31阳性细胞频数达93.1%。冻存后的细胞依然能形成管腔结构,证明标准化的冻存方法能很好地维持细胞的功能。结论建立了简便、可靠、高效的体外分离培养HUVEC的方法。
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