【摘 要】
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目的:探讨粪菌移植(fecal microbiota transplantation,FMT)对葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulfate,DSS)诱导小鼠溃疡性结肠炎(ulcerativecolitis,UC)干预作用及其炎症相关
【机 构】
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武汉大学人民医院 湖北武汉430060
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目的:探讨粪菌移植(fecal microbiota transplantation,FMT)对葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulfate,DSS)诱导小鼠溃疡性结肠炎(ulcerativecolitis,UC)干预作用及其炎症相关的分子机制.方法:30只昆明小鼠采用DSS喂养建立结肠炎小鼠模型并随机分为模型组、FMT低剂量组和FMT高剂量组,另取10只作为对照组.FMT低剂量组、FMT高剂量组自造模后第1d开始分别给予8 g/kg、15g/kg粪菌剂量灌肠处理,灌肠体积0.2 mL.对照组和模型组给予等体积生理盐水灌肠处理.分别在实验第1、7、14及21 d称量小鼠体重.实验结束后处死小鼠,取出结直肠,观察各组小鼠结直肠形态变化并通过HE染色观察病变程度.ELISA检测小鼠结直肠组织匀浆液上清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin 6,IL-6)、白细胞介素-4(interleukin 4,IL-4)和白细胞介素-10(interleukin 10,IL-10)的表达变化;免疫组化法和RT-qPCR分别检测结直肠组织中核因子κB-P65亚基(nuclear factor-κB P65,NF-κB P65)蛋白和mRNA的表达情况;Western blotting检测结直肠组织中Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)、髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)的蛋白表达情况.结果:对照组相比,造模小鼠在第6d起至第14d体重明显减轻,差异具有统计学意义(P＜0.05);与模型组相比,FMT低、高剂量组小鼠第10d起至第14d体重明显减轻,FMT高剂量组小鼠体重升高更加明显,差异具有统计学意义(P＜0.05);与对照组相比,模型组小鼠结直肠组织中TNF-α、IL-6、NF-κB P65 mRNA和蛋白阳性表达、TLR4、MyD88蛋白表达均显著升高(P＜0.05),IL-4、IL-10表达显著下降(P＜0.05);FMT高剂量组IL-4、IL-10较模型组显著升高,其余指标均显著下降(P＜0.05).结论:FMT可通过抑制TLR4/MyD88/NF-KB信号通路缓解炎症反应,发挥对UC的治疗作用.
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