利用SMART技术构建羊驼皮肤全长cDNA文库

来源 :畜牧兽医杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：facekr

【摘要】

：

为了快速、经济和有效地寻找新基因，利用大规模测序及分析技术构建羊驼皮肤组织的基因表达谱，实验构建了羊驼皮肤cDNA文库。Trizol提取皮肤总RNA后，用SMART法构建文库：经反转录反

【作者】

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赫晓燕范瑞文张俊珍程志学李鹏飞白瑞董常生

【机构】

：

山西农业大学

【出处】

：

畜牧兽医杂志

【发表日期】

：

2008年6期

【关键词】

：

全长CDNA文库 SMART技术羊驼皮肤 full- length cDNA library SMART technology alpaca skin

【基金项目】

：

国家自然科学基金（30571070）,山西省科技攻关项目（2006031060）

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为了快速、经济和有效地寻找新基因，利用大规模测序及分析技术构建羊驼皮肤组织的基因表达谱，实验构建了羊驼皮肤cDNA文库。Trizol提取皮肤总RNA后，用SMART法构建文库：经反转录反应合成第一链eDNA，用LDPCR法将第一链产物再合成第二链和双链cDNA；经蛋白酶K和Sfi消化后，用CHROM AAPIN-400分离双链cDNA；将合适大小的ds cDNA通过16℃过夜孵育使其转入到载体中，将重组产物在22℃下用λ-phage孵育2h进行包装，制成文库。该cDNA文库的特征为：包装效率为10^6（p

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