【摘 要】
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利用已构建的含有HBeAg基因的重组家蚕核多角体病毒rBmHBe,摸索了HBeAg在家蚕细胞中表达的最佳条件组合,细胞接种密度:(3.2~6.4)×105细胞/瓶。病毒接种时间:细胞接种后48~60h。感染
【机 构】
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南京军区联勤部军事医学研究所分子生物学研究室,南京210002
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利用已构建的含有HBeAg基因的重组家蚕核多角体病毒rBmHBe,摸索了HBeAg在家蚕细胞中表达的最佳条件组合,细胞接种密度:(3.2~6.4)×105细胞/瓶。病毒接种时间:细胞接种后48~60h。感染复数(MOI)为0.04~0.4PFU/细胞。细胞上清经硫铵沉淀、分子筛和阴离子交换柱层析纯化获得电泳纯样品。该样品与E.coli表达的HBeAg相比,抗原性高出100倍,且与抗HBc交叉反应低至1%倍。利用该样品建立双抗原夹心法测定抗HBe,灵敏度高于目前的市售抗HBe试剂盒。
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