目的 采用ProtEx~(TM)外源蛋白修饰技术将外源蛋白FasL修饰于靶细胞,观察其在移植免疫中的作用.方法 1.将嵌合蛋白FasL(SA-FasL)修饰于大鼠脾细胞,检测蛋白的表达效率及其对脾细胞表面免疫分子的影响;分别以近交系WF大鼠和ACI大鼠作为供者和受者,进行异位心脏移植,按围手术期注射供者细胞的不同将受者分为3组:(1)SA-FasL组(n=23):注射经SA-FasL修饰的供者脾细胞;(2)SA组(n=20):注经链霉亲和素蛋白(SA)修饰的供者脾细胞;(3)Control组(n=10):未注射任何细胞,作为空白对照.术后观察移植心的跳动情况,停止跳动为发生排斥反应,持续有力的跳动超过100d为移植心长期存活.2.以链脲佐菌素(STZ)静脉注射诱导C57BL/6小鼠产生糖尿病;将SA-FasL蛋白修饰于小鼠胰岛;以近交系BALB/c小鼠作为供者,糖尿病C57BL/6小鼠作为受者,进行胰岛移植,根据移植不同的供者胰岛将受者分为组:(1)islet-FasL组(n=21):移植经SA-FasL修饰的胰岛,(2)islet-SA组(n=21):移植经SA修饰的胰岛;(3)islet组(n=14):移植未经修饰的胰岛,作为空白对照.若受者尿糖阳性,并连续2d血糖≥250 mg/ml为移植排斥反应.尿糖阴性超过100d为移植物长期存活.结果 流式细胞术检测FasL蛋白在脾细胞的平均表达率为(94.49±4.27)%,免疫荧光染色显示FasL蛋白呈红色,表达于脾细胞表面;FasL蛋白的表达干扰脾细胞表面分子CD3、CD4、CD8、CD80以及主要组织相容性复合物I类抗原的表达.SA-FasL组70%的受者移植心获得长期存活,SA组仅为25%,两组间的差异有统计学意义(P<0.05).胰岛移植术后30d,islet-FasL组67%的受者移植胰岛功能良好,29%的受者移植胰岛获得长期存活,与其他两组(均为0)比较,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 ProtEx~(TM)是简便、快速、安全和高效的外源蛋白修饰技术,过该技术将嵌合蛋白FasL直接表达于靶细胞,将对移植免疫应答发挥重要的调节作用。