【摘 要】
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目的 探索夏枯草抑制儿童甲状腺癌的有效成分及潜在作用机制。方法 通过检索中医药系统药理学（traditional Chinese medicine systems pharmacology,TCMSP）、GeneCards数据库获取夏枯草抑制儿童甲状腺癌的潜在靶点和候选药效成分。采用Cytoscape软件构建药物-成分-靶点-疾病网络，对潜在靶点进行蛋白相互作用（protein-protein i
【机 构】
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广州中医药大学深圳医院(福田)药学部
【基金项目】
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暨南大学“国家级大学生创新创业训练计划”项目（202110559095）；
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目的 探索夏枯草抑制儿童甲状腺癌的有效成分及潜在作用机制。方法 通过检索中医药系统药理学（traditional Chinese medicine systems pharmacology,TCMSP）、GeneCards数据库获取夏枯草抑制儿童甲状腺癌的潜在靶点和候选药效成分。采用Cytoscape软件构建药物-成分-靶点-疾病网络，对潜在靶点进行蛋白相互作用（protein-protein interaction,PPI）、基因本体论（gene ontology,GO）富集、京都基因与基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG）通路富集分析。采用分子对接验证有效成分与潜在靶点之间的结合。选择人乳头状甲状腺癌TPC1细胞株作为实验细胞，采用细胞增殖检测试剂盒（cell counting kit,CCK）-8评价有效成分对TPC1细胞的增殖抑制作用，流式细胞仪检测有效成分对细胞周期、凋亡的影响。采用GraphPad Prism 8.0软件进行数据统计分析并绘图，统计学方法采用单因素方差分析和t检验。结果 从夏枯草中筛选出11个抗儿童甲状腺癌的候选药效成分，对应166个潜在靶点。PPI、GO、KEGG分析预测夏枯草有效成分槲皮素、木犀草素、山柰酚可能通过抑制蛋白激酶B（protein kinase B,AKT）信号通路发挥作用。分子对接显示，AKT（PDB ID:4GV1）与槲皮素、木犀草素、山柰酚的结合能分别为-7.35、-7.17、-7.32 kcal/mol，存在较强的结合作用，能够形成稳定的复合物。CCK-8实验结果显示，这3种候选成分中槲皮素对TPC1细胞的抑制作用最强，其48 h的半数抑制浓度（half maximal inhibitory concentration,IC50）值为（19.4±4.8）μmol/L，而木犀草素IC50值为（64.8±7.7）μmol/L，山柰酚IC50值>100μmol/L。不同浓度槲皮素给药处理后，处于G2/M期的细胞比率从对照组的（12.88±1.33）%升至50μmol/L给药组的（18.97±1.50）%（P<0.01），凋亡细胞的比率从对照组的（10.34±1.76）%升至50μmol/L给药组的（30.77±4.52）%（P<0.001），呈剂量依赖性，差异具有统计学意义。结论 夏枯草有效成分槲皮素能诱导甲状腺癌TPC1细胞发生G2/M周期阻滞和凋亡，这种作用可能是通过抑制AKT信号通路实现的。
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