【摘 要】
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利用PCR方法从禽坦布苏病毒和肠炎沙门菌分别扩增出E基因和鞭毛基因保守片段(Flic AC和Flic DB),随后通过over-lapping PCR方法将Flic AC片段、E基因和Flic DB片段依序串联后
【机 构】
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福建省农业科学院畜牧兽医研究所; 福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心; 福建省禽病防治重点实验室;
【基金项目】
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现代农业产业技术体系建设专项资金(CARS-42);福建省属公益类科研院所基本科研专项(2016R1022-1、2016R1022-9);福建省自然科学基金项目(2017J01059、2017J01060);福建省扶贫项目(2017-6)
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利用PCR方法从禽坦布苏病毒和肠炎沙门菌分别扩增出E基因和鞭毛基因保守片段(Flic AC和Flic DB),随后通过over-lapping PCR方法将Flic AC片段、E基因和Flic DB片段依序串联后获得Flic AC-E-Flic DB目的片段,克隆到p MD18-T载体中获得重组质粒p MD-Flic AC-E-Flic DB,经Bam HⅠ和HindⅢ双酶切后接入p ET-32a载体,构建原核表达重组质粒p ET-Flic AC-E-Flic DB。表达质粒转化入感受态细胞BL21(DE3)后,经IPTG诱导后表达出Flic AC-E-Flic DB嵌合蛋白,Western-blot鉴定证实与预期融合蛋白一致。
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