用siRNA表达框架抑制CYP450 2E1基因转录筛选高效的RNA干扰位点及构建该位点的siRNA表达载体

来源 :胃肠病学和肝病学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhaojunchao2003
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目的:寻找高效抑制P450 2E1因转录的位点,构建该位点的siRNA的表达载体。方法:参照Harborth J的方法,选择siRNA的4个靶位点,用LineSilence TN^RNA干扰转录试剂盒产生PCR的扩增产物作为表达框架,直接转染E47细胞,产生siRNA抑制CYP450 2E1基因转录,筛选高效抑制P450 2E1基因表达的位点,以筛选出的高效位点构建BS/U6/CYP2E1表达质粒,转染E47细胞,观察该质粒在E47细胞中发生RNAi的效果。
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