人卵泡抑素基因短发夹RNA表达质粒的构建及其干扰效果的初步鉴定

来源 :中国计划生育学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sun_merry
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摘要目的:构建人卵泡抑素(FS)基因短发夹RNA(shRNA)真核表达质粒,并瞬时转染方式初步鉴定其干扰效果。方法:依据GenBank数据库提供的人Fs基因mRNA核苷酸序列,利用Ambion网站上siRNA软件设计shRNA干扰靶序列,将该序列克隆到线性化的pLKO.1质粒载体上,构建pLKO.1-FS—shRNA重组质粒,并进行酶切和测序鉴定。确认质粒构建成功后,用脂质体(LipofectamineTM2000)将重组质粒瞬时转染3AO人卵巢癌细胞系,并用实时定量反转录PCR法检测重组质粒对FS基因的
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