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叔戊醇作为反应介质，固定化脂肪酶Novozym435催化大豆油与甲醇的转酯反应制备生物柴油。叔戊醇消除了反应底物甲醇及反应副产物甘油对酶活的负面影响。定量分析表明，叔戊醇与油脂的体积比为1，甲醇与油脂的摩尔比为3，2％脂肪酶，反应体系含水量2％，40℃、180r／min条件下反应15h，生物柴油得率可达97％。在最适条件下反应进行160批次，酶仍保持了较高的活性和良好的稳定性。