【摘 要】
：
目的近年来,双链RNA介导的基因沉默(RNA干扰)已在许多动植物中发现,并成为研究基因功能的强有力的工具.为确定蚊虫细胞中是否有RNA干扰现象,以期为利用RNAi效应消除蚊虫抗药
【基金项目】
：
国家自然科学基金;南京医科大学校科研和教改项目
论文部分内容阅读
目的近年来,双链RNA介导的基因沉默(RNA干扰)已在许多动植物中发现,并成为研究基因功能的强有力的工具.为确定蚊虫细胞中是否有RNA干扰现象,以期为利用RNAi效应消除蚊虫抗药性研究奠定基础. 方法设计5′端带T7启动子的绿色荧光蛋白(GFP)及糜蛋白酶特异性引物,PCR扩增目的基因获得5′端带有T7启动子DNA片段,体外转录成单链RNA,退火后形成双链RNA.转染带有GFP基因的昆虫细胞表达载体pAct.GFP和双链RNA进入C6/36 蚊虫细胞,72 h后收集细胞,用激光共聚焦显微镜和流式细胞仪检测GFP的表达差异,用半定量RT-PCR检测GFP的mRNA的表达水平. 结果转染糜蛋白酶基因双链RNA和pAct.GFP质粒的细胞及仅转染pAct.GFP的细胞的GFP表达水平没有明显差异;转染GFP基因的双链RNA和pAct.GFP质粒的细胞的GFP表达水平显著下降,达40%～50%,GFP的mRNA的表达水平也相应下降了60%. 结论在蚊虫细胞内,双链RNA能特异性的抑制相应的同源性基因的表达,引起基因沉默,证实蚊虫细胞内RNA干扰现象的存在.
其他文献
目的观察口腔颌面部炎症血液流变学变化.方法对100例口腔颌面部炎症病人与100例正常对照组血液流变学指标进行分析.结果口腔颌面部炎症病人血浆比粘度显著高于对照组(P＜0.01),
目的:探讨利培酮治疗老年期精神分裂症的有效性及安全性. 方法:分别用利培酮和氟哌啶醇对62例老年期精神分裂症患者进行8周治疗.疗效评定采用阳性与阴性症状量表(PANSS),不良
介绍了铝镁锰合金直立锁边板的简化计算方法，以及屋面板固定支座的受力计算，为相关的设计施工人员作为参考。
薄煤层开采的特殊性造成薄煤层长壁机械化开采发展缓慢。目前主要以炮采和机采为主。国内外薄煤层机械化开采较成熟的工艺主要有长壁式开采、螺旋钻机开采、连续采煤机房柱式
龙头石电站位于四川石棉县境，距石棉县约23km，定子机座分6瓣制造和运输，在工地组焊后进行叠片。定子铁芯全长2060mm，全圆由45张冲片叠成。其内径为中12530mm，外径为中13200mm，定子
目的了解农村社区人群安全注射相关知识、态度和行为状况.方法采用分层随机抽样,对两县1689人进行问卷调查.结果社区人群中53.8%的人不知道非安全注射的危害,30.4%不知道当地
目的探讨各种不同类型的不对称乳房的手术治疗方法.方法对48例不同类型的不对称乳房者,分别采用不同的乳房成形术进行矫治,其中包括两侧不同容积的乳房假体隆乳术(19例),单侧
介绍了大庆市卫生局发挥护理专业优势,把护理工作延伸到社区;发挥护士素质特长,把健康理念落实到社区;发挥护士特有的潜能,全心全意服务于社区.通过社区护理工作,使卫生服务
目的探讨后路腰椎管减压、RF内固定、Vigor Spacer椎间融合器和小关节突间植骨治疗腰椎滑脱并腰椎管狭窄临床疗效.方法对37例腰椎滑脱患者进行腰椎管减压、RF内固定、Vigor S
目的 探讨电视胸腔镜在肺癌完全性及姑息性手术治疗中的作用。方法 2 0 0 2年 2月至 2 0 0 3年 8月采用电视辅助胸腔镜手术 (VATS)治疗肺癌 43例。其中ⅠA期 5例 ,ⅠB期 1