【摘 要】
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目的 观察结缔组织生长因子(CTGF)对大鼠肾脏成肌纤维细胞增殖及细胞外基质(ECM)成分Ⅰ型胶原生成的影响,并探讨ERK1/2途径在其中的作用.方法 原代培养肾皮质成肌纤维细胞,应
【机 构】
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北京大学第一医院肾脏内科北京大学肾脏病研究所,100034;
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目的 观察结缔组织生长因子(CTGF)对大鼠肾脏成肌纤维细胞增殖及细胞外基质(ECM)成分Ⅰ型胶原生成的影响,并探讨ERK1/2途径在其中的作用.方法 原代培养肾皮质成肌纤维细胞,应用5-溴-2-脱氧尿嘧啶(BrdU)掺入法和细胞计数法检测细胞增殖;West印迹法检测细胞上清液中Ⅰ型胶原的蛋白水平及细胞内ERK1/2的磷酸化水平.结果 CTGF明显促进成肌纤维细胞的增殖,呈时间和剂量依赖性,100 μg/L组第4天时,细胞数为对照组的1.6倍(P＜0.05).CTGF刺激可显著增加培养上清液中Ⅰ型胶原的蛋白水平[为对照组的(2.6±1.2)倍,P＜0.05].CTGF刺激细胞5 min后ERK1/2即发生磷酸化,持续至15 min,30 min以后迅速降至基础水平.用ERK1/2阻断剂PD98059预处理30 min后,CTGF促进细胞增殖效应(7%±5%比85%±7%,P＜0.01)和促Ⅰ型胶原分泌作用(1.0±0.1比1.6±0.3,P＜0.05)被显著抑制.结论 CTGF能够促进成肌纤维细胞的增殖和Ⅰ型胶原的分泌,其作用可能通过ERK1/2信号通路实现.
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