论文部分内容阅读
目的
探讨Musashi-2 (MSI-2)基因小干扰RNA (siRNA)对急性髓系白血病细胞株THP-1细胞增殖的抑制作用及其下游通路基因NUMB表达的影响。
方法选择针对MSI-2基因三种不同的siRNA片段，在脂质体介导下转染THP-1细胞，采用MTT法、集落形成实验及Annexin Ⅴ/PI法分别观察沉默MSI-2基因后对细胞增殖、集落生成和细胞凋亡的影响；Western blot法检测caspase-3、PARP和NUMB蛋白表达水平。
结果HSS 133730片段干扰后MSI-2 mRNA及蛋白水平的降低最明显。转染MSI-2 siRNA 24 h后，THP-1细胞增殖抑制率为(47.89±7.64)%，明显高于阴性对照组(无关序列)(P=0.005)。培养9 d后，MSI-2 siRNA组细胞集落数为7.50±1.53，明显低于阴性对照组的35.75± 7.46(P<0.001)；转染MSI-2 siRNA 24和48 h后，THP-1细胞凋亡率分别为(15.22±1.52)％和(33.83± 3.96)%，均明显高于阴性对照组的(9.67±1.27)％和(12.42±2.07)%(P值分别为0.008和0.001)，并伴随caspase-3和PARP剪切增加；同时也观察到潜在下游基因NUMB上调。
结论沉默MSI-2基因能抑制THP-1细胞增殖，诱导细胞凋亡；上调NUMB可能是其分子作用机制之一。