北京棒杆菌E31天冬氨酸激酶突变体T361D酶学性质表征

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对北京棒杆菌(Corynebacterium pekinense)中天冬氨酸激酶(aspartate kinase,AK)进行定点改造,为改善突变株的酶学性质,提高突变株的酶活力,削弱或解除AK的反馈抑制作用。对高度保守的T361位点进行定点突变及高通量筛选,以大肠杆菌BL21为裁体,使突变体T361D在载体中实现高效表达,经分离及纯化后进行酶学性质和动力学的研究。结果表明:与野生型(wildtype,WT)相比,突变体T361DVmax提高7.63倍,最佳反应pH值降低为7.0,最佳反应温度升至30℃,
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