目的 观察过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPAR-γ)在大鼠腹膜间皮细胞(RPMCs)中的表达以及脂多糖(LPS)的调节作用,并探讨PPAR-γ天然配体15d-PGJ2及人工合成配体ciglitazone对RPMCs表达CD40和ICAM-1的影响.方法分离及培养RPMCs,常规传代及鉴定,取第2代细胞用于实验研究.LPS不同浓度(0.1、1.0、10、50及100 μg/ml)、LPS(1μg/ml)处理后不同时间点及15d-PGJ2(3μmoμ/L)、ciglitazone(10 μmol/L)作用细胞36 h后收集细胞.RT-PCR检测PPAR-γ、CD40以及ICAM-1 mRNA表达.免疫细胞化学检测PPAR-γ在RPMCs中的分布.Western印迹检测PPAR-γ及ICAM-1蛋白表达.结果 (1)常规培养的RPMCs表达一定量PPAR-γ,表达部位主要分布于RPMCs细胞核内,在细胞浆微弱表达.(2)随着LPS浓度逐渐增大,PPAR-γ蛋白表达水平呈逐渐增高的趋势,LPS浓度为10 μg/ml时其表达为最高峰.LPS(1μg/ml)作用12 h时PPAR-γ蛋白表达最强,PPAR-γ1表达高于PPAR-γ2;之后显著降低,持续至72 h.(3)LPS刺激后RPMCs CD40mRNA表达显著增强;15d-PGJ2、ciglitazone显著降低CD40 mRNA表达(P均＜0.01).(4)LPS刺激后RPMCs ICAM-1蛋白表达显著增加;15d-PGJ2增加LPS介导的ICAM-1 mRNA表达(P＜0.01),但显著抑制ICAM-1蛋白表达(P＜0.05).ciglitazone对LPS介导的ICAM-1 mRNA和蛋白表达均有显著抑制作用(P均＜0.05).结论RPMCs结构性表达PPAR-γ.LPS调节PPAR-γ表达呈现先增强后抑制趋势.PPAR-γ配体可显著抑制LPS介导的CD40 mRNA和ICAM-1蛋白的表达.提示RPMCs功能性表达PPAR-γ,可能通过负性调节炎症介质分泌而参与腹腔局部防御。
腹膜间皮细胞过氧化物酶体增殖物活化受体γ的表达及其配体对CD40和细胞间黏附分子1的影响
【摘 要】
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目的 观察过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPAR-γ)在大鼠腹膜间皮细胞(RPMCs)中的表达以及脂多糖(LPS)的调节作用,并探讨PPAR-γ天然配体15d-PGJ2及人工合成配体ciglitazone对RPMCs表达CD40和ICAM-1的影响.方法分离及培养RPMCs,常规传代及鉴定,取第2代细胞用于实验研究.LPS不同浓度(0.1、1.0、10、50及100 μg/ml)、LPS(1μg/
【机 构】
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510080,广州,中山大学附属第一医院肾内科,510080,广州,中山大学附属第一医院肾内科,510080,广州,中山大学附属第一医院肾内科,510080,广州,中山大学附属第一医院肾内科,5100
【出 处】
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中华肾脏病杂志
【发表日期】
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2005年21期
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