【摘 要】
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目的 建立高效液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）法快速可靠的测定小鼠血浆中四氢生物蝶呤（BH4）的浓度。方法 BH4通过苯甲酰氯（BC）衍生化后转化为BH4–BC,以合成BH4-BC-d5为内标，在Polar-Imidazole（2.1 mm×100 mm, 2.2μm）色谱柱上进行色谱分离，以流动相15%乙腈水溶液(含10 mmol·L-1甲酸铵-0.2%甲酸)-乙腈（含0.2%甲酸）进行梯
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（81571376）；
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目的 建立高效液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）法快速可靠的测定小鼠血浆中四氢生物蝶呤（BH4）的浓度。方法 BH4通过苯甲酰氯（BC）衍生化后转化为BH4–BC,以合成BH4-BC-d5为内标，在Polar-Imidazole（2.1 mm×100 mm, 2.2μm）色谱柱上进行色谱分离，以流动相15%乙腈水溶液(含10 mmol·L-1甲酸铵-0.2%甲酸)-乙腈（含0.2%甲酸）进行梯度洗脱，流速：0.35 mL·min-1;选用电喷雾离子源，正离子模式及多反应监测模式进行检测。结果 血浆中BH4的线性范围为5～200 ng·mL-1（r=0.999 1）,定量下限为5 ng·mL-1,线性关系良好且方法学考察均符合生物样品分析的要求，在方法学应用中发现糖尿病小鼠血浆BH4水平明显低于非糖尿病小鼠，血浆基质对于BH4测定无明显干扰。结论 本方法血浆用量少、灵敏度高，适用于小鼠血浆中BH4浓度的测定，可为BH4相关领域的未来研究发展奠定坚实的基础。
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