重组人源抗HBsAg单链抗体的纯化及亲和常数测定

来源 :中国病理生理杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:litang007
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目的:对融合6×His标签的人源抗乙型肝炎表面抗原单链抗体的包涵体进行纯化和复性,并对复性产物的抗原结合性质进行鉴定.方法: 工程菌表达的包涵体裂解后,金属螯合亲合层析纯化,然后以尿素透析、盐酸胍透析和金属螯合亲和层析柱原位复性3种方法进行复性;复性产物以免疫亲和层析精制,非竞争酶免疫法测定亲和常数结果:盐酸胍透析复性产物的比活性最高,蛋白回收率为(61.08±1.45)%;精制后的重组单链抗体的亲和常数为(2.30±0.32)×107 L/mol. 结论: 本株单
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