【摘 要】
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将随机合成的寡聚核苷酸重组到噬菌体表面单价表达载体,构建了噬菌体随机八肽库。以抗原识别性明确的单克隆抗体9E10固相化,对噬菌体短肽库进行了4~5轮“吸附-洗脱-扩增”的筛选,任选多个
【机 构】
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北京市肿瘤防治研究所; 北京医科大学临床肿瘤学院; 解放军海军总医院; 中国医学科学院肿瘤研究所;
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将随机合成的寡聚核苷酸重组到噬菌体表面单价表达载体,构建了噬菌体随机八肽库。以抗原识别性明确的单克隆抗体9E10固相化,对噬菌体短肽库进行了4~5轮“吸附-洗脱-扩增”的筛选,任选多个所获克隆进行ELISA检测。发现第4轮后6/22个克隆可与9E10结合,第5轮后10/10可与9E10结合,此结合反应可被9E10所针对的十肽抗原以及游离的9E10特异性抑制。对所获阳性克隆进行DNA序列测定发现,它们的序列可分为两种,其中一种序列与c-myc十肽具有同源序列ISExxL,而另一种的序列则完全不同。证实噬菌体表面单价表达体系用于构建噬菌体短肽库的有效性,为进一步筛选其它的具有高亲和力的特异性短肽打下了基础。
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