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目的克隆结核杆菌新抗原Mtb8.4基因,并构建真核表达载体pcDNA 3.1(+)-mtb8.4.方法提取人结核杆菌H37Rv株的基因组作为模板,进行PCR扩增,获得mtb8.4目的基因后,与pcDNA 3.1(+)载体进行连接重组.结果 pcDNA 3.1(+)-mtb8.4真核表达载体构建完成后,用限制性内切酶消化、PCR及DNA序列分析等多种方法进行鉴定,证实其构建成功.结论 pcDNA 3.1(+)-mtb8.4真核表达质粒的成功构建,为进一步研究该真核表达质粒的免疫保护效果及制备结核病pcDNA