观察短期禁食对小鼠肝脏缺血再灌注损伤的作用,并探索其作用机制。
方法将8周龄野生型C57BL/6雄性小鼠按照数字随机法分为75%肝缺血再灌注(IR)损伤组(IR组)、短期禁食+ 75%肝IR损伤组(STS组)、sirtinol +短期禁食+ 75%肝IR损伤组(SIR组),并分别设立假手术组(IR-Sham组、STS-Sham组和SIR-Sham组)。检查各组小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平、肝组织形态学改变情况,及肝组织沉默信息调节因子2相关酶1(Sirt1)、微管相关蛋白1轻链3B (LC3B)、P62蛋白表达情况与LC3B荧光染色情况。多组数据比较采用方差分析法,两组间数据比较用t检验。
结果与IR组相比,STS组小鼠ALT [(3 152.7±735.6)U/L与(8 414.2±1 052.2)U/L,t = 10.00,P < 0.01]和AST[(3 577.0±714.0)U/L与(10 845.8±1 145.7)U/L,t = 13.19,P < 0.01]水平均显著降低;肝组织病理学损伤明显减轻(Suzuki评分为1.50±0.55与3.50±0.55,t = 6.33,P < 0.01);而SIR组ALT [(7 002.7±1 485.2)U/L]和AST [(8 980.7±1 739.1)U/L]水平再次升高,与STS组相比,差异均有统计学意义[t = 5.69, P < 0.01(ALT); t = 7.04, P < 0.01(AST)],病理学损伤也较STS组明显加重(Suzuki评分为3.33±0.52与1.50±0.55,t = 5.97, P < 0.01)。STS组及STS-Sham组肝组织中Sirt1基因及蛋白表达水平分别较IR组及IR-Sham组明显提高,LC3B蛋白表达水平明显提高,P62蛋白表达水平明显下降,LC3B染色阳性细胞比率明显升高(22.83%±5.19%与10.16%±3.06%,t = 5.15,P < 0.01; 22.17%±4.83%与10.83%±1.94%,t = 5.33, P < 0.01);而在SIR组及SIR-Sham组肝组织中,Sirt1表达水平较STS组及STS-Sham组显著下降,LC3B蛋白表达水平显著下降,P62蛋白表达水平显著提高,LC3B染色阳性细胞比率明显下降(11.83%±9.24%与22.83%±5.19%,t = 2.54,P = 0.029;14.67%±4.68%与22.17%±4.83%,t = 2.73,P = 0.021)。
结论短期禁食可有效减轻肝脏IR损伤。其对肝脏的保护作用可能与增加Sirt1表达及诱导、促进肝组织细胞自噬、减少肝细胞死亡有关。