目的:研究归术益坤方治疗多囊卵巢综合征(PCOS)的作用机制。方法:通过体外培养大鼠卵巢颗粒细胞,以丙酸睾丸酮(TP)、自噬诱导剂C2-神经酰胺作用颗粒细胞24h,建立大鼠PCOS颗粒细胞的自噬模型;实验分为空白组,模型组,归术益坤方低、中、高剂量组及自噬阻断剂3MA组。通过Western blot法检测各组颗粒细胞中LC3Ⅱ、p53、p-m TOR、p-AMPK的表达。结果:与空白组比较,模型组LC3Ⅱ的表达显著增加(P<0.01);与模型组比较,归术益坤方高、中、低剂量组表达降低(P<0.01)。与空白组比较,模型组p53、p-m TOR显著降低(P<0.01),p-AMPK升高(P<0.01);与模型组比较,高剂量归术益坤方可以上调p53和p-m TOR的表达(P<0.01,P<0.05);高、中剂量归术益坤方可下调p-AMPK的表达(P<0.01)。结论:归术益坤方可以通过调控p53/AMPK信号通路来抑制自噬,这可能是归术益坤方治疗PCOS的新机制。