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以海绵态壳聚糖为载体,0.25%戊二醛为交联剂固定化单宁酶,确定固定化酶的最佳工艺参数为:给酶量6mg/g载体、固定化pH5.0、固定化温度4℃、固定化时间8h。制备的固定化单宁酶Km为3.83mmol/L,而游离酶的Km为33mmol/L。固定化酶的热稳定性、酸碱稳定性均高于游离酶,稳定pH范围向酸性方向偏移。