【摘 要】
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为对hpt基因编码蛋白进行的安全性评价,建立一种简便、高效的体外微生物表达体系,以获得大量的HPT蛋白,将用于植物转化的hpt基因的全编码序列克隆到原核表达载体pGEX4T-3上,
【机 构】
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中国疾病预防控制中心营养与食品安全研究所卫生部微量元素营养重点实验室,中国科学院遗传研究所植物遗传分子操作开放实验室
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(863计划)，国家重点基础研究发展计划(973计划)
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为对hpt基因编码蛋白进行的安全性评价,建立一种简便、高效的体外微生物表达体系,以获得大量的HPT蛋白,将用于植物转化的hpt基因的全编码序列克隆到原核表达载体pGEX4T-3上,在E.coli BL21中进行诱导表达,所得融合蛋白主要以包涵体的形式存在,且与Glutathione Sephrose 4B纯化介质的结合率不高.后经优化诱导表达的各种条件,成功地获得了可溶性的融合蛋白,该蛋白具有明显的生物活性.经Glutathione Sephrose 4B亲和层析,所得蛋白纯度>95%.动物实验显示
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