论文部分内容阅读
YlyA是枯草杆菌一种功能未知蛋白。本研究旨在建立可溶性YlyA的诱导表达体系和纯化方法，为其功能研究奠定基础。PCR扩增ylyA序列，将其克隆到pETMCSIII中构建表达载体pNG252，用IPTG诱导6×His-YlyA融合蛋白在大肠杆菌B121（DE3）中表达，对表达产物进行分析，最后对可溶性YlyA重组蛋白进行Ni^2＋-NTA亲和层析加以纯化。结果表明pNG252中ylyA的插入方向正确，序列无突变；用0．5mmol／L IPTG，37℃诱导3h时，YlyA虽高效表达，但为包涵体形式