绵羊羊水干细胞外源基因高效转染及快速筛选方法的建立

来源 :中国畜牧兽医 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qisucha
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试验旨在建立绵羊羊水来源多潜能干细胞(amnioticfluid—derivedstemcells,AFSC)外源基因高效转染及快速筛选方法,同时保持其多潜能特性。采用脂质体法,以pCMV-DsRed为报告质粒,转染绵羊AFSC,36h后,流式细胞仪分析外源基因的瞬时转染效率为69.17%。以浓度为6mg/mL的G418筛选5h获得纯化转基因绵羊AFSC单克隆。转基因绵羊AFSCRT—PCR检测表达Oct-4、SSEA-1,体外悬浮培养可形成类胚体。结果表明,转基因标记绵羊AFSC保持了发育全能性的潜能,
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