【摘 要】
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为获得猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)NS2-3抗原集中区蛋白,并建立CSFV抗体快速检测方法。本研究以CSFV全长基因组质粒为模板,PCR扩增NS2-3抗原表位集中区,利用
【机 构】
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河南科技学院,新乡学院生物技术研究中心
【基金项目】
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国家自然科学基金(31201877);河南省基础与前沿技术研究(122300410003)(122300410150);河南省教育厅科学技术研究重点项目(13A230837)共同资助
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为获得猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)NS2-3抗原集中区蛋白,并建立CSFV抗体快速检测方法。本研究以CSFV全长基因组质粒为模板,PCR扩增NS2-3抗原表位集中区,利用扩增片段和克隆载体,构建重组表达质粒,命名为pET32a-NS2-3-1。重组表达质粒转化Rosetta(DE3)细胞,利用IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳和Western-blot鉴定重组表达产物。结果表明,重组质粒pET32a-NS2-3-1在28℃诱导5h得到高效表达,重组蛋白能够与兔抗CSFV阳性血清发生反应。获得CSFVNS2-3抗原集中区蛋白,并且获得的重组蛋白具有抗原性,能够作为CSFV抗体检测的抗原。
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