核糖核酸酶保护法MD-2探针的制备

来源 :第三军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wgl_future

【摘要】

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目的构建用于核糖核酸酶保护法的MD-2转录质粒并制备反义RNA探针.方法 PCR扩增目的片段,并定向亚克隆至pSP72质粒T7启动子下游的多克隆位点,以T7 RNA聚合酶转录合成反义RNA探

【作者】

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陈永华李昌麟王韵蒋建新朱佩芳张宗梁

【机构】

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第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所第四研究室,中国科学院生化与细胞生物学研究所

【出处】

：

第三军医大学学报

【发表日期】

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2003年20期

【关键词】

：

RNA探针核糖核酸酶保护法

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目的构建用于核糖核酸酶保护法的MD-2转录质粒并制备反义RNA探针.方法 PCR扩增目的片段,并定向亚克隆至pSP72质粒T7启动子下游的多克隆位点,以T7 RNA聚合酶转录合成反义RNA探针.结果亚克隆插入的片段经测序、酶切鉴定,序列及方向完全正确,成功制备了用于的反义RNA探针.结论成功地制备了用于核糖核酸酶保护法的MD-2转录模板和探针,为深入研究内毒素信号受体相关机制以及MD-2的基因表达创造了必要的条件.

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