人胃癌转移型裸鼠移植瘤cDNA文库构建及分析

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从人转移型胃癌裸鼠移植瘤中抽提出总RNA,分离出多聚腺苷酸RNA,合成双链cDNA,接上ECoRI接头,以pT7T3 18U质粒为载体,以大肠杆菌NM522为受体菌,构建了人转移型胃癌裸鼠移植瘤cDNA文库。该文库含1.5×10~6转化子,插入片段cDNA长度为0.4~6.0Kb,重组效率为80%,并用四种癌基因探针筛选了阳性克隆。 Total RNA was extracted from transplanted human gastric cancer xenografts in nude mice. Poly A RNA was isolated, double-stranded cDNA was synthesized, followed by ECoRI linker, pT7T3 18U plasmid was used as vector, and Escherichia coli NM522 was used as acceptor. Human metastatic gastric cancer xenograft tumor cDNA library was constructed. The library contains 1.5×10~6 transformants, the insert cDNA length is 0.4~6.0Kb, the recombination efficiency is 80%, and the positive clones are screened by four oncogene probes.
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