【摘 要】
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目的 MicroRNA (miR)-19b是通过芯片筛选出与心脏发育高度相关的一种miRNA,本研究旨在研究miR-19b通过Wnt/β-catenin信号通路对P19细胞的影响.方法 生物信息学软件预测miR-1
【机 构】
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210004,南京医科大学附属南京市妇幼保健院儿科江苏大学附属宜兴市人民医院儿科;
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目的 MicroRNA (miR)-19b是通过芯片筛选出与心脏发育高度相关的一种miRNA,本研究旨在研究miR-19b通过Wnt/β-catenin信号通路对P19细胞的影响.方法 生物信息学软件预测miR-19b潜在靶基因;双荧光素酶报告基因验证miR-19b是否作用于Wnt的预测靶点;脂质体2000转染miR-19b过表达质粒与空载质粒进入P19细胞;CCK-8法检测细胞增殖活性;磷脂酰丝氨酸外翻分析检测细胞凋亡;Westem blot检测Wnt1表达水平;实时定量-聚合酶链反应(PCR)检测miRNA-19b表达水平.结果 TargetScan 5.1软件预测Wnt1为miR-19b在P19细胞中发挥作用的潜在靶点,双荧光素酶报告基因进行了验证,miR-19b过表达显著降低了靶基因Wnt的活性(P＜O.05);miR-19b过表达降低了Wnt信号通路中Wnt1和β-catenin的表达水平,两者水平表达一致,于第2天至第10天均有统计学差异(P均＜0.05).与空载对照组相比,miRNA-19b可促进P19细胞的增殖(各时间点P＜0.05),并且抑制其凋亡(P＜0.05).结论 miR-19b可能通过Wnt/β-catenin信号通路促进P19细胞的增殖,抑制凋亡,为其以后用于心脏发育的进一步研究奠定基础.
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