扣囊复膜孢酵母α-淀粉酶基因在乳酸克鲁维酵母中的表达与重组酶性质

来源 :工业微生物 | 被引量 : 0次 | 上传用户：tanscuc2

【摘要】

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通过PCR方法从扣囊复膜孢酵母基因组DNA中克隆获得α-淀粉酶基因成熟肽编码区（SfA），插入乳酸克鲁维酵母表达载体pKLACl的d因子信号肽下游，构建重组表达载体pKLACl-SfA。重组载体

【作者】

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郭玉婉沈微王一恬樊游陈献忠王正祥

【机构】

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江南大学工业生物技术教育部重点实验室,天津市工业微生物重点实验室天津科技大学生物工程学院

【出处】

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工业微生物

【发表日期】

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2014年2期

【关键词】

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扣囊复膜孢酵母 α-淀粉酶乳酸克鲁维酵母麦芽三糖 Saccharomycopsis fibuligera α-amylase Kluyveromyc

【基金项目】

：

新型糖酶创制与创新应用关键技术研究,新型糖酶的研发与应用（国家高技术研究发展计划863计划,项目编号：2013AA102101-5）.

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通过PCR方法从扣囊复膜孢酵母基因组DNA中克隆获得α-淀粉酶基因成熟肽编码区（SfA），插入乳酸克鲁维酵母表达载体pKLACl的d因子信号肽下游，构建重组表达载体pKLACl-SfA。重组载体转化乳酸克鲁维酵母GG799，筛选获得表达α-淀粉酶SfA水平较高的重组茵。酶活检测和SDS．PAGE电泳检测均显示，重组茵分泌重组酶SfA到发酵液中。酶学性质研究表明：SfA最适温度为45℃，最适pH5．0，在pH4．5～5．5、50℃条件下保持稳定。Ca2＋等二价金属离子对SfA酶活有激活作用，EDTA强烈的抑

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